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鲎试验法

相关实验:细菌内毒素检测实验

最新修订时间:

原理

鲎是一种海洋节肢动物,血液中含有一种变形细胞,此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应,即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活,使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。
 
 

材料与仪器

鲎试剂
生理盐水 无菌水 内毒素
安瓶 习惯 水浴箱

步骤

一、材料
 
1.  鲎试剂(即装于安瓶内的鲎变形细胞裂解物的冻干制品)。
 
2.  待测物(血液、细菌培养上清液或注射剂等)。
 
3.标准内毒素(大肠杆菌内毒素含量100 ng/ml)、无热原生理盐水、无菌蒸馏水。
 
4.1 ml无菌吸管、37℃水浴箱等。
 
二、方法
 
1.  打开3支鲎试剂安瓶,各加0.1 ml无菌蒸馏水使之溶解,同时编号①、②、③。
 
2.  向①、②、③安瓶中分别加待测物、标准内毒素、无热原生理盐水各0.1 ml。
 
3.  轻轻摇匀后,垂直放37℃水浴,15~30 min后取出观察有无凝固。
 
三、结果观察
 
十十 形成牢固凝胶,倒持安瓶凝胶不动。
 
十 形成凝胶,但不牢固,倒持安瓶凝胶能动。
 
- 不形成凝胶。
 
凡结果阳性者表示内毒素阳性,本实验②为阳性对照,③为阴性对照。

来源:丁香实验

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