原理
鲎是一种海洋节肢动物,血液中含有一种变形细胞,此细胞的裂解物可与微量细菌内毒素起凝胶反应,即细胞裂解物中的一种酶被内毒素激活,使细胞裂解物中蛋白质形成凝胶。鲎试验具有快速、简便、灵敏等优点。
材料与仪器
鲎试剂
生理盐水 无菌水 内毒素
安瓶 习惯 水浴箱
生理盐水 无菌水 内毒素
安瓶 习惯 水浴箱
步骤
一、材料
1. 鲎试剂(即装于安瓶内的鲎变形细胞裂解物的冻干制品)。
2. 待测物(血液、细菌培养上清液或注射剂等)。
3.标准内毒素(大肠杆菌内毒素含量100 ng/ml)、无热原生理盐水、无菌蒸馏水。
4.1 ml无菌吸管、37℃水浴箱等。
二、方法
1. 打开3支鲎试剂安瓶,各加0.1 ml无菌蒸馏水使之溶解,同时编号①、②、③。
2. 向①、②、③安瓶中分别加待测物、标准内毒素、无热原生理盐水各0.1 ml。
3. 轻轻摇匀后,垂直放37℃水浴,15~30 min后取出观察有无凝固。
三、结果观察
十十 形成牢固凝胶,倒持安瓶凝胶不动。
十 形成凝胶,但不牢固,倒持安瓶凝胶能动。
- 不形成凝胶。
凡结果阳性者表示内毒素阳性,本实验②为阳性对照,③为阴性对照。
来源:丁香实验