原理
应用不染色标本可直接观察活细菌的形态和运动,且能避免由于某些染色操作而引起细菌变形,常用的不染色标本的制备方法有悬滴法和压滴法。
材料与仪器
枯草杆菌6~12h肉汤培养物 葡萄球菌6~12h肉汤培养物
凡士林
载玻片 凹玻片 盖玻片 接种环 煤气灯
凡士林
载玻片 凹玻片 盖玻片 接种环 煤气灯
步骤
一、悬滴法
取清洁的凹玻片和盖玻片各一张,涂少许凡士林于凹玻片窝的周围;取一接种环枯草杆菌肉汤培养物滴于盖玻片之中央,将盖玻片迅速翻转,复盖于凹玻片窝上(图1-1)。轻压盖片,使其固定并密封,防止菌液变干,便于长时间观察。同法再以葡萄球菌肉汤培养物做一悬滴片。
镜检方法:将集光器稍降下,使视野内光线变暗。用低倍镜找出悬滴的边缘,然后换用高倍镜或油镜观察滴内细菌的形态和运动。枯草杆菌有鞭毛能运动。它们可向不同方向运动,速度较快,相互间的位移很大。葡萄球菌没有鞭毛不能做固有运动,但由于受水分子的撞击而呈分子运动(布朗氏运动),只在一定范围内作往复颤动,相互间位移不大。按细菌运动性的不同,可以推知细菌有无鞭毛,这是鉴别菌种的要点之一。
二、压滴法
分别取枯草杆菌和葡萄球菌肉汤培养物,放于载物片中央。小心地把盖玻片放于液滴之上,勿使中间产生气泡,中间液层越薄越好。镜检方法与悬滴法相同。本法较悬滴法简单,但标本容易干涸,不能长时间观察(注意:勿将菌液压溢到玻片边缘之外)。
常见问题
一、附录
接种环和接种针:接种环又称为白金耳,接种针又称为白金线,是细菌取材或接种的常用工具。前端通常用细电炉丝制成,损坏时可自行更换;也可用白金丝制作,但价格昂贵。
来源:丁香实验