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固态发酵法

相关实验:曲米红曲色素制备

最新修订时间:

原理

红曲色素是红曲霉在生长代谢过程中产生的红色天然色素。红曲霉是目前世界上唯一生产食用色素的微生物。红曲色素可以通过固体和液体发酵两种方法培养红曲霉。红曲色素与其它天然色素相比,具有热稳定性好,蛋白作用力强,色调柔和,对酸碱稳定,还可以提高加工制品对光、热和氧的稳定,而且红曲色素无毒性,无致突变作用,安全性高。
 
红曲色素有水溶性色素和脂溶性色素两类。水溶性色素有一部分可溶于有机溶剂中,而脂溶性色素则不易溶于水中。红曲色素在乙醇和醋酸中的溶解性比较好。目前国内大致有两类:红曲米和红曲米提取物或深层发酵红曲霉提取物 。红曲霉所产生的色素已被确定出化学结构有6 种,可分为3 类, 即红色素Monascorubramine与Rubropunctamine 、橙色素Monascorubin 与Rubropunc2tatin 及黄色素Ankaflavin 与Monascin。

材料与仪器

红曲霉菌种
大米 无菌水 酒精
三角瓶 分光光度计 瓷盘 纱布 无菌吸管

步骤

一、工艺流程
 
大米→洗米→泡米(8 h-10 h,将水沥干)→分装(40g/250 ml三角瓶)→蒸米(121℃,20 min)→趁热将米摇散→喷水冷却(34℃)→接入红曲霉菌种(在无菌操作台中取保藏斜面一支,加入15 ml无菌水中,摇匀,制备红曲霉菌悬液,每瓶接种5 ml红曲霉菌悬液)→恒温培养(32℃-34℃,7 d),敲瓶(1次/d),加无菌水保湿→检测(成熟度检测;色价测定)→烘干(40℃-45℃,12 h)→成品

二、红曲米成熟度测定方法
 
主要为目测,每天观察红曲米的成熟度,从红曲米的红色程度判断红曲米是否成熟以及是否污染。此外,还要定期在无菌操作台上取红曲米少许,破碎,观察红曲米内心是否还有发白现象,从而判断红曲米的成熟度。
 
三、色价测定方法
 
当红曲米红透后,在无菌操作台上取红曲米少许,置于平皿中,放在干燥箱中40℃-45℃干燥12 h-14 h,使之完全干燥。取干燥后的红曲米0.1 g,研磨至粉碎,转移至试管中,然后加70%酒精9 ml,60℃水浴浸提2 h,取出后过滤,再用70%酒精稀释500倍,使用7200型可见光分光光度计在505 nm处测定其吸光度。计算色价。
 
色价=吸光度A×稀释倍数/重量=吸光度A×5000

来源:丁香实验

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