原理
1. 丹参酮ⅡA (TanshinoneⅡA)
来源于为唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.) 的干燥根及根茎、南欧丹参(Salvia sclarea L.) 根或陇西鼠尾草的根。桔红色针状结晶(EtOAc), mp 209~210 ℃。易溶于乙醇,丙酮,乙醚,苯等有机溶剂,微溶于水。
2. 正交实验设计原理
正交试验设计(Orthogonal experimental design)是研究多因素多水平的又一种设计方法,它是根据正交性从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验,这些有代表性的点具备了"均匀分散,齐整可比"的特点,正交试验设计是分式析因设计的主要方法。是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。日本著名的统计学家田口玄一将正交试验选择的水平组合列成表格,称为正交表。例如作一个三因素三水平的实验,按全面实验厦门大学医学院药学系-天然药物化学实验讲义要求,须进行33=27种组合的实验,且尚未考虑每一组合的重复数。若按L9(33)正交表安排实验,只需作9次,若按L18(37)正交表则进行18次实验,显然大大减少了工作量。因而正交实验设计在很多领域的研究中已经得到广泛应用。
正交表是一整套规则的设计表格,用 L为正交表的代号,n为试验的次数,t为水平数,c为列数,也就是可能安排最多的因素个数。例如L9(34),它表示需作9次实验,最多可观察4个因素,每个因素均为3水平。
来源于为唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.) 的干燥根及根茎、南欧丹参(Salvia sclarea L.) 根或陇西鼠尾草的根。桔红色针状结晶(EtOAc), mp 209~210 ℃。易溶于乙醇,丙酮,乙醚,苯等有机溶剂,微溶于水。
2. 正交实验设计原理
正交试验设计(Orthogonal experimental design)是研究多因素多水平的又一种设计方法,它是根据正交性从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验,这些有代表性的点具备了"均匀分散,齐整可比"的特点,正交试验设计是分式析因设计的主要方法。是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。日本著名的统计学家田口玄一将正交试验选择的水平组合列成表格,称为正交表。例如作一个三因素三水平的实验,按全面实验厦门大学医学院药学系-天然药物化学实验讲义要求,须进行33=27种组合的实验,且尚未考虑每一组合的重复数。若按L9(33)正交表安排实验,只需作9次,若按L18(37)正交表则进行18次实验,显然大大减少了工作量。因而正交实验设计在很多领域的研究中已经得到广泛应用。
正交表是一整套规则的设计表格,用 L为正交表的代号,n为试验的次数,t为水平数,c为列数,也就是可能安排最多的因素个数。例如L9(34),它表示需作9次实验,最多可观察4个因素,每个因素均为3水平。
材料与仪器
丹参粗粉
水
容量仪 抽滤器 微孔滤膜 HPLC
水
容量仪 抽滤器 微孔滤膜 HPLC
步骤
1. 提取方法
分别精密称取丹参粗粉2.5 g, 按正交试验表L9 (33)安排实验,药材浸泡30 min后,超声提取,抽滤收集滤液,量取滤液体积。精确吸取滤液0. 25 ml置与25 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤,HPLC测定。
2. 正交设计
根据丹参酮ⅡA的理化性质,选择在提取中三个影响因素,采用三因素水平的正交试验表L9 (33 )设计试验方案,见下表。
分别精密称取丹参粗粉2.5 g, 按正交试验表L9 (33)安排实验,药材浸泡30 min后,超声提取,抽滤收集滤液,量取滤液体积。精确吸取滤液0. 25 ml置与25 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,微孔滤膜过滤,HPLC测定。
2. 正交设计
根据丹参酮ⅡA的理化性质,选择在提取中三个影响因素,采用三因素水平的正交试验表L9 (33 )设计试验方案,见下表。
3. 正交实验数据处理:参照下表处理方法,以纯度和转移率为指标,选择最优提取方法。
来源:丁香实验