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酵母菌基因组DNA的提取实验

最新修订时间:

材料与仪器

酵母菌
SE缓冲液 山梨醇 EDTA 溶菌酶 PVP 蛋白酶K缓冲液 Tris
高速冷冻离心机 台式离心机 恒温水浴 低温冰箱 冷冻真空干燥器 取液器 电泳仪 水平电泳槽 紫外观测仪

步骤

1. 1.5 ml 对数生长期细菌细胞。

2. 离心,12 000 rpm,1-2 min。

3. 沉淀。

4. 溶于590 ul SE缓冲液中混匀+10 ul 溶菌酶37℃,1 hr。

5. 离心,12 000 rpm,8~10 min。

6. 沉淀。

7. 溶于100 μL,0.5 μl 蛋白酶K,混匀,37℃,1 hr。

8. 加入1.2 ml 的CTAB/NaCL,200 μl 2 0%PVP 混匀 65℃,30 min。

9. 等体积酚/氯仿/异戊醇混合液,混匀。

10. 离心,12 000 rpm,4~5 min。

来源:丁香实验

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