材料与仪器
载玻片
苏木精染料 氢氧化铵 伊红染料
水浴锅 培养箱
苏木精染料 氢氧化铵 伊红染料
水浴锅 培养箱
步骤
1. 将显影过的载玻片(在玻片架中)放入盛有水的染色盘中。
2. 按编号在染色盘中准备以下各组液体。
(1)苏木精染液
(2)水
(3)水
(4)0.1% NH4OH
(5)水
(6)水
(7)伊红染液
(8)95%乙醇
(9)100%乙醇
(10)100%乙醇
(11)二甲苯
(12)二甲苯
(13) 二甲苯
2. 按编号在染色盘中准备以下各组液体。
(1)苏木精染液
(2)水
(3)水
(4)0.1% NH4OH
(5)水
(6)水
(7)伊红染液
(8)95%乙醇
(9)100%乙醇
(10)100%乙醇
(11)二甲苯
(12)二甲苯
(13) 二甲苯
3. 在苏木精染液中染玻片20~30 s(勿染过深),水中浸泡2次,每次2 min。
4. 快速浸于0.1%氢氧化铵,然后浸入水中。
4. 快速浸于0.1%氢氧化铵,然后浸入水中。
5. 以水浸洗5 min,然后用伊红染色20~30 s。 ‘
6. 在同一盛95%乙醇的盘中,浸冼玻片8次,然后,于100%乙醇中浸8次,再置100%乙醇中2 min 使完全脱色,在二甲苯中平衡3次,每次2 min。
图一、用固片截止固定载玻片示意图
7. 按基本方案1,步骤5~9操作,进行固片处理。
注意事项
1. 如在0.1%氢氧化铵中浸泡时间过长,放射自显影乳胶会从玻片上脱离。
2. 如染色过深,可将玻片浸于50%乙醇中,脱色片刻(观察染料扩散状况),如染色过弱,可再染色。
2. 如染色过深,可将玻片浸于50%乙醇中,脱色片刻(观察染料扩散状况),如染色过弱,可再染色。
来源:丁香实验