基本方案

1.  将已解剖的器官或胚胎置于写有标签的20 ml 螺口玻璃小瓶中（经硅烷化处理的玻璃瓶专用于小量样品的处理），如入4℃新鲜配制的4%PFA，置4℃固定至所需时间止。

 

2.  于60℃烘箱中熔化石蜡。

3.  固定完成后，倒去固定液（注意勿丢失样品），以50%乙醇替代。然后立即换新鲜的乙醇，在50%乙醇中脱水3次，室温放置每次20 min。继而以70%乙醇脱水3 次，室温每次20 min。（样品于70%乙醇中在4℃可存数日）。

4.  室温下，置样品于95%乙醇2次，毎次20 min。

5.  室温下，置样品于100%乙醇2次，每次20 min。

 

6.  以二甲苯换去100%乙醇，然后立即换以新鲜二甲苯，在二甲苯中放置2次，每次10 min。

 

7.  倒去二甲苯并加5 新鲜的二甲苯于每个盛样品的小瓶中，用一热的玻璃吸管加等量的已熔化石蜡（操作要快，防止凝结），混匀，置样品于室温过夜。 

8.  置样品瓶于60℃温箱中熔化混合的石蜡/二甲苯。准备1个60℃加热块，其上的孔可放进20 ml 的样品瓶，当石蜡/二甲苯混合物熔化后，将瓶移至加热块上。

9.  将石蜡/二甲苯混合液倒于废液瓶中，立即以热的玻璃吸管加入新熔化的石蜡。将样品瓶放回加热块中。重复此步骤，逐一完成每一样品。将样品瓶放回60℃温箱中，温育1 h。