辅助方案（细胞核提取方法的优化）

1.  按基本方案中歩骤1~7操作。

 

2.  将细胞核悬液分成5等份。在冷室内不断搅拌，按如下方法在每份悬液中加入1/3体积髙盐缓冲液，在第1份中加浓度最低（0.8 mol/l）的高盐缓冲液，其余各份中依次加入KCl浓度逐渐增髙（直到1.6 mol/l）的高盐缓冲液。轻轻混合30 min。

3.  25 000 g 离心30 min。将上清进行透析（见基本方案步骤10），直到加浓度最髙的那份核悬液的电导达到与透析液一致（100 mmol/l KCl）。各份提取物25 000 g 离心20 min。

 

4.  检测各份提取物的电导并测定蛋白质浓度（见基本方案步骤12）。用预定的方法分析提取物以确定最佳提取条件。