原理
聚丙烯酰胺凝胶加人甲酰胺可以使造成条带压缩的测序产物的二级结构不稳定。
材料与仪器
DNA
甲酰胺 甲醇 乙醇 TEMED SDS
电泳仪
甲酰胺 甲醇 乙醇 TEMED SDS
电泳仪
步骤
1. 按基本方案步骤1~5组装凝胶平板夹层。
4. 在45~70 W 恒功率下电泳。
2. 按所需浓度配制甲酰胺凝胶溶液，加热轻轻挽拌使之溶解，冷却至30℃以下。
3. 加入0.15 ml TEMED及1 ml 10%过硫酸铵，马上灌胶于凝胶平板夹层，观察聚合情况。
3. 加入0.15 ml TEMED及1 ml 10%过硫酸铵，马上灌胶于凝胶平板夹层，观察聚合情况。
4. 在45~70 W 恒功率下电泳。
5. 按基本方案步骤19~33进行干胶及处理，但步骤18在5%乙酸 / 20%甲醇固定液中固定凝胶15 min。
来源：丁香实验
