变性凝胶电泳实验
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简介
来源：丁香实验
操作方法
1. 制作每块凝胶时，首先要用肥皂及水小心严格地清洗两块30 cm×40 cm的前后玻璃平板，用去离子水冲洗后晾干，用喷射洗瓶喷10%乙酵或异丙醇使平板湿海。 2. 然后用Kimwipe纸或其他无绒纸巾将平板擦干。 3. 戴手套在通风橱工作，用浸湿了含5%二甲基二氯硅烷的氯仿溶液的Kimwipe纸在每片平板的其中一面加一层此溶液，并小心洗擦拭整面平板。 4. 待硅化层干后，用Kimwipe纸
缓冲液梯度测序胶1. 按基本方案步骤1~5组装凝胶平板夹层。 2. 在2个100 ml 烧杯中，配制缓冲液梯度凝胶溶液：50 ml 用0.5×TBE配制，25 ml 用2.5×TBE配制，在50℃以下加热至固体完全溶解，冷却至室 温，加人20 μl TEMED和200 μl 10%SDS过硫酸氨于0.5 ×TBE / 凝胶溶液，轻轻混匀。加入10 μl TEMED及100 μl 10%过硫酸铵于2.
电解质梯度测序胶1. 按基本方案步骤1~22灌制凝胶及进行预电泳，但上槽缓冲液为0.5×TBE，下槽为1×TBE。 2. 按基本方案步骤23~26步准备样品及加样。 3. 如需测≤400碱基的序列信息，加入3 mol/l 乙酸钠于下槽缓冲液至终浓度1 mol/l， 执行步骤5。 4. 如果需测大于400碱基的序列信息，先按步骤5进行，电泳2~3 h，然后加入3 mol/l 乙酸钠于下
含甲酰胺的测序胶1. 按基本方案步骤1~5组装凝胶平板夹层。 2. 按所需浓度配制甲酰胺凝胶溶液，加热轻轻挽拌使之溶解，冷却至30℃以下。 3. 加入0.15 ml TEMED及1 ml 10%过硫酸铵，马上灌胶于凝胶平板夹层，观察聚合情况。 4. 在45~70 W 恒功率下电泳。 5. 按基本方案步骤19~33进行干胶及处理，但步骤18在5%乙酸 / 20%甲醇固定液中固定凝胶
