原理
研究用芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测系统分离测定经7-chloro-4-nitrobenzo-2-oax-1，3-diazole(NBD-Cl)衍生的麻黄碱和伪麻黄碱的实验条件。采用胶束毛细管电动色谱分离体系(12 mmol/L SDS+10 mmol/L硼砂缓冲液,pH9.0)，在45 mm长的通道上实现了麻黄碱和伪麻黄碱的快速分离，一次分离小于1.5min。10～100 mg/L范围内,峰高与浓度呈良好的线性关系，麻黄碱、伪麻黄碱的检出限分别是0.83 mg/L和1.10 mg/L。
材料与仪器
尿液样品
盐酸麻黄碱标准品 盐酸伪麻黄碱标准品 NBD2Cl 十二烷基磺酸钠 PEP标准溶液 乙腈
共聚焦式激光诱导荧光检测系统 倒置显微镜 光电倍增管
盐酸麻黄碱标准品 盐酸伪麻黄碱标准品 NBD2Cl 十二烷基磺酸钠 PEP标准溶液 乙腈
共聚焦式激光诱导荧光检测系统 倒置显微镜 光电倍增管
步骤
1. 芯片的制作
十字通道玻璃芯片制备。分离通道总长45 mm(有效长度38 mm)，进样通道总长10 mm，通道顶宽50 μm，深15 μm。
2. 尿样预处理
取5 mL尿样于20 mL离心管，加入2 mL乙醚和1 g无水Na2SO4，振荡5 min后离心分离。移取上层有机相于2 mL离心管，用N2吹干，加100 μL水溶解残留物。
3. 待测物的衍生
移取EP和PEP混合标准溶液(或上述溶液)100μL于2 mL的离心管，加入100μL 100 mmol/L硼砂缓冲液(pH8.4)，25 mmol/L NBD-Cl溶液200 μL，用水稀释至1 mL后，50℃水浴中温浴30 min。
4.分离测定
十字通道依次用0.1 mol/L NaOH、水、运行缓冲溶液各冲洗20、10、20 min。在芯片的试样废液池、缓冲液池、缓冲液废液池中加入运行缓冲液,并使通道内充满运行缓冲液;在试样液池中加入试样溶液,使激光束聚焦于芯片分离通道下游离十字交叉口38 mm处。按下列程序分别向4个储液池施加电压,进行进样和分离操作：进样30 s，试样液池、试样废液池、缓冲液池、缓冲液分别施加1000、0、830、1000 V；分离120 s，试样液池、试样废液池、缓冲液池分别施加2170、2170、2600和0 V电压。
注意事项
1. 注意夹流电压的选择。
2. 不同SDS浓度对分离影响不同。
3. 选择合适的pH、分离电压。
常见问题
来源《芯片毛细管电泳激光诱导荧光快速分离检测麻黄碱类兴奋剂》
来源：丁香实验
