生物药糖基化位点检测

【材料】生物药

（1） 使用trypsin或其他适当的蛋白酶对样品进行酶切； （2） 选取合适的色谱柱对N-glycopeptides, O-glycopeptides及其他多肽进行分离； （3） 脱糖基化处理； （4） 通过MALDI-TOF MS, ESI-MS或MS/MS 对多肽图谱进行分析，找出糖基化的理论位置； （5） 通过多肽图谱确定每一个N-/O-糖原的位点； （6） 对不同批次样品的糖基化位点进行比对。

在收取样品后首先对样品进行酶切，释放抗体的Fc domain和Fab，然后对糖基化片段进行分离，通过MALDI TOF MS或nano LC-ESI-MS/MS对糖基化位点进行确证。