材料与仪器
【 器材 】
1 ．培养皿 2 ．恒温培养箱
【试剂 】
1 ． LB 培养基
2 ．选择性 LB 琼脂培养平板（含氨苄青霉素，终浓度为 50μg/ml ）
3 ．氨苄青霉素 100 mg/ml
4 ．宿主细菌：经 100 mmol/L CaCl 2 处理的感受态细菌 DH5α
步骤
取 50 μL 大肠杆菌感受态细胞，加入适量质粒（体积不得超过 4 μL ）冰浴 30 min 后， 42℃ 热激 90 s ，马上放回冰上，冰浴 2 min ；加 400 μL LB 培养基，于 37℃ 摇床慢摇振荡培养 45-60 min ；取 50-100 μL 涂在含有氨苄青霉素（ 100 μg/mL ）的 LB 固体培养基上， 37℃ 倒置培养过夜。
注意事项
严格按照顺序加入试剂
来源：丁香实验
