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简介
氨基酸 (amino acid) 是组成蛋白质的基本单位,也是蛋白质的分解产物。植物根 系吸收和同化的氮素主要以氨基酸和酰胺的形式进行运输。所以测定植物组织中不同时期、 不同部位游离氨基酸的含量,对于研究根系生理、氮素代谢等有一定意义。本实验的目的是 掌握站三酮显色法测定氨基酸含量的原理和方法。
原理
植物组织中游离氨基酸总量的测定的基本原理是氨基酸的游离氨基与水合站三酮反应 (如下)。首先,氨基酸脱氨脱殁被氧化,水 合帯三酮被还原成还原型站三酮。接着,还原型弗三酮与另一个氧化型带三酮分子和氨缩合 生成蓝紫色化合物,称为 Ruhemans 紫。其吸收峰为 570 nm, 且在一定范围内,其颜色深浅 与氨基酸的含量成正比。据此,可用分光光度计在波长 570 nm 下测定反应产物的吸光度值, 根据标准曲线计算岀未知样品中氨基酸的总量。脯氨酸与站三酮反应生成黄色物质,需另行测定。
来源:丁香实验团队
操作方法
氨基酸 (amino acid) 是组成蛋白质的基本单位,也是蛋白质的分解产物。植物根 系吸收和同化的氮素主要以氨基酸和酰胺的形式进行运输。所以测定植物组织中不同时期、 不同部位游离氨基酸的含量,对于研究根系生理、氮素代谢等有一定意义。本实验的目的是 掌握站三酮显色法测定氨基酸含量的原理和方法。