完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

已有一种方法可用来从 SDS-PAGE 凝胶中提取完整蛋白质并对其进行 MALDI-TOF MS 分析，以确定其分子质量。这种方法包括一个电洗脱步骤以及在 MALDI-TOF 质谱分析之前的一个低温基质/ 分析物共结晶步骤。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。

来源：丁香实验

操作方法

完整蛋白质从 SDS-PAGE 胶中的电洗脱及其 MALDI-TOF MS 分析

3.1 蛋白质检测一般而言，凝胶染色和脱色非常易于操作。在本实验方法中，我们使用 ElectroBlue 染料代替有固定作用的考马斯亮蓝染色液显色蛋白质（见注释 1) 。 ( 1 ) SDS-PAGE 电泳后，用 300 ml Milli-Q 水或去离子水漂洗凝胶（8 cm X 10 cm ) 3 次，每次 10 min。 ( 2 ) 用 ElectroBlue 染料给凝胶染色，用大