番茄叶和根二维差异凝胶电泳(DIGE)实验

实验分类：

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

我们可以通过双向荧光差异凝胶电泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)来分析同一植物两个不同组织器官蛋白的差异表达。

原理

这个方法包括收集成熟番茄的叶和根，从收集的组织中制备蛋白质提取物，在差异凝胶电泳前荧光标记样本，一维和二维电泳分离以及图像定量差异蛋白表达量。

来源：植物蛋白质组学实验指南

操作方法

番茄叶和根二维差异凝胶电泳（DIGE)

3.1 叶和根组织的收集和沉淀蛋白 ( 1 ) 从植物的中部切取绿色叶片，迅速放入塑料袋里冷却。如果没有冰箱，可先放到冰上，再放入 -20°C 保存。 ( 2 ) 对于根部组织，从茎部下面切一寸的根，摇晃根部并迅速放入水中洗掉泥土，连续洗 3 次，然后再迅速放入塑料袋里速冻或放在冰上暂时保存。 ( 3 ) 称取 2.5 g 速冻的根及叶组织，除去多余的茎及其他杂质，用预冷的剪刀将这些组织剪