收藏
三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白实验
最新修订时间：
简介
本章我们介绍一种适用于各种植物组织全蛋白抽提的高效方法。该方法利用三氯乙酸和含有巯基乙醇的丙酮在沉淀蛋白质的同时使其变性。同时，我们还将介绍分别在进行经典的 IEF 电泳或用IPG 胶条电泳之前的蛋白质溶解方法。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。
来源：丁香实验
操作方法
1. 蛋白质沉淀与变性 ( 1 ) 用研钵和研槌在液氮中将植物材料研磨成细小的粉末（ 见注释 4) 。 ( 2 ) 将约 200 μl 粉末转移到 2 ml 的离心管中，加入 1.8 ml 预冷的三氯乙酸-2ME-丙酮溶液（见注释 5) ，混和后置于 -20°C 1 h。三氯乙酸和丙酮可以使蛋白质变性并沉淀 ，同时还可以使各种多酚氧化酶和其他氧化酶类失活，从而阻止因酚类被氧化为醒类而导致的蛋白
提问
扫一扫
实验小助手
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序