农杆菌介导的大麦转化方法实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

在过去 10 年中，农杆菌介导的大麦转化方法已被广泛运用，它在获得转基因植株的效率和质量方面，比基因枪介导的转基因技术更具有优势。这种方法可以产生大量可育的转基因独立株系，因此是进行禾谷类作物基因功能研究的理想方法。本实验来源「麦类作物转基因技术与田间鉴定实验指南」〔英〕H.D.琼斯 P.R .休里主编。

来源：丁香实验

操作方法

农杆菌介导的大麦转化方法

1. 组织培养基的准备提前准备好所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 3 ) 。所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，调到合适的 pH 后，过滤灭菌（使用瓶顶过滤器， 0.22 μm 微孔滤膜，Millipore) 。使用前将 2x 凝胶和 2x 培养基在水浴锅中加热至 60℃。将所需储备液在无菌条件下加入到热的培养基中，培养基和