基因枪法转化大麦实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

微粒子轰击也称基因枪法，已被广泛应用于禾谷类作物的基因转化。这类方法通过加速轰击包裹着质粒 DNA 的金粉微粒而将 DNA 直接带入植物细胞。第一例完全可育的转基因大麦就是采用基因枪法获得的。本实验来源「麦类作物转基因技术与田间鉴定实验指南」〔英〕H.D.琼斯 P.R .休里主编。

来源：丁香实验

操作方法

基因枪法转化大麦

1. 组织培养基的准备 ( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 2 ) 。 ( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀，调到合适的 pH 后过滤灭菌（使用瓶顶过滤器、0.22 μm 微孔滤膜）。 ( 3 ) 使用前将 2x 凝胶和 2x 培养基在水浴锅中加热至 60℃。 ( 4 ) 将所需储备液在无菌条件