生物体内的一部分氧分子,在参与酶促或非酶促反应时,若只接受一个电子,会转变为超氧阴离子自由基(O2-)。O2- 既能与体内的蛋白质和核酸等活性物质直接作用,又能衍生为H2O2羟自由基(•OH)、单线态氧(1O2)等。•OH可以引发不饱和脂肪酸脂质(RH)过氧化反应,产生一系列自由基,如:脂质自由基(•R)、脂氧自由基(RO•)、脂过氧自由基(ROO•)和脂过氧化物(ROOH),自由基积累过多时会对细胞膜及许多生物大分子产生破坏作用。本实验主要掌握植物体内氧自由基的测定原理及方法。
植物体内氧自由基含量的测定实验一、材料仪器设备及试剂
1. 材料:花生、绿豆、大豆黄化幼苗的下胚轴及其他植物叶片。
2. 仪器设备:高速冷冻离心机,分光光度计,恒温水浴锅,研钵,试管,移液管,试管架,移液管架,洗耳球等。
3. 试剂配制:
50 mmol·L-1磷酸缓冲液(pH7.8)
1 mmol·L-1盐酸羟胺
17 mmol·L-1对氨基苯磺酸(以冰醋酸 :水 = 3 :1配制)
7 mmol·L-1 α-