λ噬菌体DNA限制性内切酶图谱分析

λ噬菌体是分子遗传学研究中常用的生物材料,其DNA的酶切片段常作为测定DNA分子量大小的标准物。限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异碱基序列的DNA水解酶,主要存在于原核细胞中。根据这些酶的差别,可分别命名为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。Ⅰ型和Ⅲ型限制性内切酶在同一蛋白分子中兼有修饰(甲基化)作用及依赖于ATP的限制(切割)活性,但不能在特异序列中降解DNA,因此在它的酶图谱分析与分子克隆中很少应用,主要应用的是Ⅱ型酶,因为这种类型的酶能识别高度特异性的4～6个核苷酸序列,切割后产生5′端突出的互补单链末端(粘性末端)或没有单链突出的平端(或称钝端)。这两种末端均可用T4连接酶进行连接。虽然DNA平端连接效率较粘性末端效率低,但其具有普遍适应性,因此成为分子生物学常用的一种DNA连接策略。来源：《遗传学实验教程》