亚硝基胍的诱变作用与营养缺陷型菌株的筛选实验

遗传学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

从自然界得到的野生型菌株一般都能在基本培养基上生长。经物理或化学因子处理后,部分野生型细胞的基因发生突变,丧失合成某种必需物质(如氨基酸、维生素、碱基等)的能力,因而不能在基本培养基中生长,只有在基本培养基中补加这种物质时才能生长。这种在营养上表现出某种缺陷的变异菌株,称为营养缺陷型菌株,它是遗传学、分子生物学研究以及实际应用中不可缺少的重要材料。来源：《遗传学实验教程》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

(一)诱变处理1.菌悬液的制备挑取少许斜面菌种接入5mlCB培养液中,置30℃振荡(200r/min)培养8h,取0.5ml培养物转入另一5ml CB培养液中,继续振荡培养过夜。取过夜培养物经4000r/min离心8min,弃去上清液;先加入1ml的柠檬酸缓冲液(pH5.5)于离心管中搅匀沉淀物,再加4ml同样的缓冲液制成菌悬液;经4000r/min离心8min,如此反复将菌体洗涤两次,最后加入5