纯化的基因组 DNA 的微球菌核酸酶消化实验

实验分类：

遗传学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

MNase 可以非随机切割 DNA。因此，为确定这种天然的非随机性的模式是如何受核蛋白如组蛋白影响的，染色质的 MNase 切割模式与自由的基因组 DNA 的 MNase 切割模式的对比是十分重要的。

来源《精编分子生物学实验指南第五版》

来源：丁香实验

操作方法

纯化的基因组 DNA 的微球菌核酸酶消化实验

1. 取 100 ug 基因组 DNA 加入到室温的核缓冲液 C 中，使终体积为 300 ug。准备 4～5 管此溶液。重要提示：对于每个溶液，直到反应进行到第 4 步后再进行下一管的反应。2. 加入 CaCl2 至终浓度为 3 mmol/L。3. 加入 MNase 至 0.5、1、2、3 U/ml。剧烈地混合使酶均匀的分布（溶液可能有些黏稠），反应 3 min。4. 将溶液转移到含有 50 ul