苯巴比妥钠和放线菌素D对小鼠肝脏细胞色素P-450含量的影响实验

药学

最新修订时间：2022-02-10

简介

P-450 属于血红素蛋白，其还原型与CO 结合后，在波长450 nm 处出现吸收峰。因此，可以应用示差光谱法测定其含量。肝匀浆样品中通以CO 后，加还原剂连二亚硫酸钠（Na₂S₂O₄），然后在450 nm 和490 nm 处测定吸光度，其差值代入公式，即可计算出细胞色素P450的含量。

来源：丁香实验

操作方法

示差光谱法

动物分为3组：生理盐水组，苯巴比妥钠组及放线菌素D组。 1. 苯巴比妥钠和放线菌素Di.p.三天，诱导或抑制肝药酶。 2. 断头放血：于第三天（实验当日）将小鼠断头放血（须放净，因血红素会影响实验结果）； 3. 制备肝匀浆：将0.25M的蔗糖溶液和0.05MTris-HCl缓冲液置于冰块中预冷；剪下肝脏（肝组织不得少于400mg；勿破坏胆囊，因胆色素干扰实验结果；以滤纸吸去血迹，因血色素干扰