鸡胚成纤维细胞制备实验

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

减毒的复制缺陷痘苗病毒 Ankara（MVA），作为标准痘苗病毒株的替代物，可以作为载体表达外源蛋白。MVA 是痘苗病毒 Ankara 在鸡胚成纤维细胞中通过多次传代（>570 次）得到的。尽管MVA可以高效表达重组蛋白，但其在人类和大部分哺乳动物细胞中不能包装成具有感染能力的病毒颗粒，因此需制备专门用于培养 MVA 的鸡胚成纤维细胞。

本实验主要介绍鸡胚成纤维细胞的制备。

内容来源于《精编分子生物学实验指南（第五版）》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 将 10 只 9 日龄鸡胚有空气部分朝上放置，喷上 70% 乙醇。2. 用无菌的解剖剪将鸡蛋的顶部打开，剪掉膜上蛋壳，使膜保持完整。用无菌镊子将膜取掉。其他鸡蛋亦重复相同操作。3. 取出鸡胚，放入无菌的 100 cm2 培养皿。4. 剪掉每个鸡胚的头和足，将剩余的身体放入无菌的 100 cm2 平皿中，加入 10 ml 无添加剂的 MEM 培养基。通过 10 ml 注射器（5 个鸡胚/注射器

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