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简介
来源:丁香实验
操作方法
1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上。 酵母提取物 6.0 g,蛋白胨 12.0 g,葡萄糖 12.0 g,偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg,琼脂 10.0 g,加水到 600 ml。 2. 用 10 mol/L NaOH 调节 pH 值到 6.0,使体积到 600 ml。 3. 以 200 ml/份分装液体培养基,分装到 250 ml
SC培养基1. 在 1 L 的带螺旋盖的瓶中或锥形瓶中将下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振荡器上混匀。 酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物 0.4 g,蒸馏水 600 ml,琼脂 10.0 g。 2. 用 10 mol/L 的 NaOH 调整 pH 值到 5.6。最终 pH 值为 5.6 是重要的,它是转化子
SC选择培养基混合物的制备1. 配制下述试剂: 2. 将单独不加尿嘧啶、色氨酸、亮氨酸或组氨酸的粉状成分合在一起,装入一个干净的塑料瓶中。 3. 加入 3 或 4 个干净的玻璃珠,剧烈震荡以混匀。
用于检测酵母中β-半乳糖苷酶活性的培养1. 在 1 L 的螺旋盖瓶或锥形瓶中将下面的成分溶于水中,置于搅拌器上混匀。 酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC-Ura 或 SC-Trp 或 SC-Len 或 SC-His 的混合物 0.4 g,蒸馏水 565.0 ml,琼脂 10.0 g。 2. 将培养基高压灭菌并冷却到 55℃。 3. 小心加入 35 ml 灭菌的 1.0 mol/L pH 为 7.0 的磷酸钾缓冲液
用于筛选针对URA3表型的培养基1. 将下述试剂溶于 300 ml 水中,加热到 60℃ 并搅拌。 溶液 A:酵母氮碱基 4.0 g,葡萄糖 12.0 g,SC 混合物 0.4 g,5-FOA 0.6 g,H2O 300ml。 2. 用 2 μm 的滤膜过滤除菌。 3. 将 10 g 琼脂溶于 300 ml 水中,高压并冷却到 60℃(溶液 B )。 4. 小心将溶液 A 倒入溶液 B 中,防止形成气泡,在磁力搅拌器上彻