盘基网柄菌培养物的发育和储存实验

1. 准备饥饿培养基试剂。 2. 收集 2X108 的盘基网柄菌细胞，100 g 离心 5 分钟。用 100 ml 饥饿缓冲液洗一遍，再重悬于 10 ml 该缓冲液中。 3. 加 9 ml 细胞悬液到饥饿平板上，均匀涂布，使细胞吸附 30 分钟。 4. 很慢且小心地将尽可能多的剩余缓冲液吸走，而不吸走细胞。敞开盖子干燥 30 分钟，盖上盖子置于暗处 22℃。 5. 在所需要的时间加 10

一、冻存细胞 1. 用新鲜的 HL5 培养基收获细胞，使其密度为 2X106 到 4X106，将等分为 1 ml 的细胞悬液加入到 1.5 ml 的 Eppendorf 管或冻存管中，置于冰上。 2. 加入 111 μl DMSO，混匀，置于冰上。 3. 立即将管放入 -20℃ 冰箱冻存 2 小时。 4. 将管转移至 -70℃ 冰箱。 5. 储存一周后融化一份，以证明本方法工作良好且盘基