免疫表型的分析程序

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验来源「实用流式细胞术彩色图谱」王书奎、周振英主编。

来源：丁香实验

操作方法

细胞表面抗原检测的染色方案

1. 取 20 单克隆抗体与 100 ul 抗凝血，共同混合置室温 20 min。2. 加溶血素 1500 ul，置室温避光 15 min，2500 r/min 离心 5 min。3. 弃上清，加 1500 ulPBS，混匀，2500 r/min 离心 5 min。4. 同上操作 1 次，上仪器检测：以 CD45-PerCP/SSC 设门，观察每群细胞免疫表型。

细胞胞质内及细胞核内抗原检测的染色方案

1. 在试管中加入染膜外抗原单抗或阴性对照，在每一试管中加入大约 1x106 个细胞。混匀后，避光孵育 15 min。2. 再加入 100 ul的试剂，避光孵育 15 min。3. 用 3 ml PBS+0.1% NaN3+5%FBS 洗涤 1 次，1500 r/min 离心 5 min，去上清。4. 加入 100 ul和相应的膜内标记抗体或阴性对照。5. 混匀后，在 2~8℃ 下孵育 20 mi