病毒中和实验
最新修订时间：
简介
中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物，使病毒与抗体相互反应，再将混合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合，并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖，因此，中和试验必须在敏感的动物体内（包括鸡胚）和细胞培养中进行。中和试验的优点是敏感性和特异性高，中和抗体在体内存在时间长，大多数病毒的中和抗体与免疫力有直接关系。中和试验的缺点是要使用活的宿主系统，病毒对宿主系统产生作用需要一定的时间，因而出结果慢。
中和试验的应用很广泛，主要应用于以下几个方面：①鉴定病毒；②分析病毒抗原的性质；③测定免疫血清的抗体效价和疫苗接种后的效果；④测定病人血清中的抗体，用于诊断病毒性疾病。来源：《病毒学检验》
<link />来源：丁香实验
操作方法
细胞培养为例：（1） 用细胞维持液连续倍比稀释急性期和恢复期血清；（2） 取 1.0 mL 不同浓度的稀释血清分别与 1.0 mL 标准病毒 （100 CCID50/0.1 mL） 混合，置 37 ℃ 水浴作用1 h；（3） 取混合液 0.2 mL 分别加到细胞已长成单层的 96 孔细胞培养板中，每一稀释度接种 4 孔细胞。同时设 4 孔正常细胞对照和设 4 孔 100 CCID50/0.2 mL
固定抗血清－稀释病毒法（以细胞培养为例）：①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8); ②取 0. 6ml不同浓度的病毒稀释液与 0. 6 ml 标准的抗病毒血清混合；③再取 0.6ml 不同浓度的病毒稀释液与 0. 6 ml 已知的阴性血清混合；④将混合液置 37℃ 水浴1h, 然后取 0. 2 ml 混合液分别接种于细胞已长成单层的 96孔细胞培养板中，每一稀释度接种 5孔，设 5 孔正常细胞对照
