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细菌的致病性与宿主非特异性免疫实验

实验分类:

微生物实验

最新修订时间:

简介

观察破伤风外毒素的致病作用及破伤风抗毒素的中和作用,观察大小吞噬细胞的吞噬作用;观察溶菌酶的溶菌作用。

来源:丁香实验

操作方法

破伤风外毒素的毒性作用及破伤风抗毒素的中和作用

1. 取体重25 g左右健康小白鼠两只,分第标记1,2号。 2. 取1号小白鼠,用右手轻拖鼠尾,使其爬行粗糙物面上,再用左手拇,食两指抓紧小白鼠颈项及其两耳,左手掌握住鼠体,小指按住鼠尾以75%酒精棉球消毒腹部皮肤,腹腔应注射破伤风抗毒素0.2 ml(1500 单位/毫升),经30 min后,于小鼠右后腿肌肉注射破伤风外毒素(1:100稀释)0.2毫升。 3. 取2号小白鼠,在右后腿肌肉内注射

中性粒细胞的吞噬作用

1. 试验前一天,给小白鼠腹腔注入5%淀粉水溶液1 ml。 2. 用注射器吸取葡萄球菌菌液1-2 ml,注入小白鼠腹腔内。 3. 经30 min后,以颈椎脱臼法处死小自鼠,进行尸体解剖,取腹腔渗出液涂片。 4. 涂片自然干燥,然后加瑞氏染液数滴染1 min,再加等量蒸馏水与染料混合,继续染5 min,水洗,吸干。 5. 油镜观察中性粒细胞吞噬葡萄球菌的情况。 6. 结果:可见细胞浆被染成

巨噬细胞的吞噬作用

1. 试验前一天,给小鼠腹腔注射2%淀粉水溶液l ml,使巨噬细胞从腹膜血管渗到腹腔。 2. 制备2%鸡红细胞悬液l:取抗凝的鸡血2 ml加生理盐水8-l0 ml,混匀2000 rpm离心沉淀5 min,吸弃上清,同法再洗二次,末次2000 rpm离心沉淀10 min吸弃上清。吸压积的红细胞0.2 ml加入9.8ml生理盐水中,混匀后即为2%鸡红细胞悬液。 3. 24小时前注射淀粉的小鼠,腹腔

溶菌酶试验

1. 用打孔器在溶壁微球菌琼脂平板上打孔若干个,孔间距离15~20 毫米。用针头挑去孔内琼脂。 2. 先用清水漱口,略待片刻将唾液吐于平皿中,用毛细吸管吸出滴入孔内,注意不要溢出孔外,孔内不应有气泡。同时滴加对照标本。 3. 置24~26 ℃室温18 小时后观察结果,量溶菌环直径,并作记录。环的大小与溶菌酶的含量成正比。

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