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视神经损伤模型实验

实验分类:

生物化学实验

最新修订时间:

简介

来源:《神经生物学实用实验技术》

来源:丁香实验

操作方法

视神经横断模型及荧光金逆行标记

(1)以1%戊巴比妥钠溶液(50mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠。(2)将大鼠固定于手术台上,沿中线切开头皮挂线旷置。(3)手术显微镜下沿眶内缘小心分离左眶软组织,尽量向两眦延伸。(4)依照解剖层次分别牵开眼外肌肉,充分暴露眼球后极和视神经眶内段。(5)纵向切开视神经背侧鞘膜,注意避免伤及视网膜中央动脉。(6)在眼球后极1.5mm处以显微剪剪断视神经。(7)剪取小片封口膜并展薄,戳一小孔,容视神经残段

坐骨神经移植及荧光金逆行性标记

(1)-(5)与视神经横断模型及荧光金逆行标记相同,不再赘述。(6)在眼球后极1mm处以显微剪剪断视神经。(7)取自体大鼠一侧坐骨神经约1cm长,准备移植。(8)采用11-0带针缝合线将坐骨神经缝合到眼球后极,然后将坐骨神经的缝合端套入视神经,使其包裹住视神经,周围垫以明胶海绵,防止视神经从坐骨神经内滑脱。(9)将坐骨神经的另一端缝合到眼眶上缘。(10)术毕缝合眼眶以及头皮,抗感染处理,调整头皮张

荧光金逆行性标记(上丘及外侧膝状体)

(1)戊巴比妥钠(50mg/kg体重)腹腔内注射深度麻醉动物。(2)用颅内手术专用固定器将大鼠头部固定。(3)自颅顶正中线垂直切开头皮,长约3-4cm,使用双氧水擦拭头皮,暴露矢状缝和人字缝。(4)找到Bregma点,确定双侧上丘(以Bregma点为零点,后移6.8mm,旁开1.6mm)和外侧膝状体(以Bregma点为零点,后移4.6mm和旁开3.8mm)在颅骨表面投影,造成4个直径约1mm的骨孔

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