酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验

实验分类：

生物化学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

由于玻璃对强酸和溶剂有抵抗能力，并且它具有紧密的固体结构，因此在技术过程方面成为了酶固定的有价值的材料。然而，严重的缺点是玻璃的惰性和较小的可接受表面。为了引入反应基到惰性玻璃表面，必须在固定反应之前硅烷化。

来源：《酶学实验手册》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

1. 玻璃珠的活性玻璃珠（10 g）在 40 ml 5％硝酸中 80～90℃ 加热 1 h。其后珠子用蒸馏水洗三次，并被转移到 PE 容器中避免硅烷化和酶固定到长颈瓶的壁上。添加水（10 ml）和 3 g 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷，pH 先用浓 HCl 调节，最终用 2 mol/L 的 HCl 将 pH 调到 3～4，用 pH 指示纸来检测（pH 电极会被损坏）。反应的混合物在 65℃ 中孵化