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简介
Evans Blue 染色是的用途非常广泛,在小动物的活体实验中涉及到心血管系统、神经系统、骨骼肌系统等疾病的研究,这里我们主要介绍了 Evans Blue 染色联合 TTC(2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑)来区分小鼠心脏缺血再灌注损伤后危险区及梗死区。
原理
通过构建小鼠的心脏缺血再灌注损伤模型(I/R 模型),小鼠心脏受损后可分为以下三个区域:(i)非缺血区;(ii)危险区(area at risk,AAR 区)(iii)梗死区(Infarct size,IS 区)。
Evans Blue 是一种常用的实验方法,用于观察心肌梗死区域和未受损区域,属于一种水溶性荧光染料,能够进入损伤的心肌细胞并结合到细胞膜上,形成蓝色颜色,因此 Evans Blue 主要着色区域为非缺血区,呈蓝色。
TTC 属于一种氧化还原指示剂,能够被心肌细胞中的酶反应还原为红色物质,可以用于观察心肌细胞完整性,只有代谢活动较强的心肌细胞才会呈现红色。因此主要着色区域为梗死区,为白色,而危险区不会被染色,呈现原有的心肌颜色,为红色。
应用
Evans Blue + TTC 双染色法是一种组合技术,可以同时观察心肌细胞完整性和代谢活动,心脏 Evans Blue + TTC 双染色主要用于评估小鼠心脏缺血再灌注损伤模型中危险区和梗死区面积的相对大小,将心脏损伤后受损程度可视化,从而进行心肌梗死区域的定位和分析。
来源:Circ Res. 2022 Aug 19;131(5):442-455. doi: 10.1161/CIRCRESAHA.122.321365. Epub 2022 Jul 28
操作方法
Evans Blue 染色是的用途非常广泛,在小动物的活体实验中涉及到心血管系统、神经系统、骨骼肌系统等疾病的研究,这里我们主要介绍了 Evans Blue 染色联合 TTC(2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑)来区分小鼠心脏缺血再灌注损伤后危险区及梗死区。
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