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表达与纯化的平行方法实验

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简介

蛋白质的性质是多种多样的,这使得使用平行方法表达和纯化蛋白质具有挑战性。平行方法尤其可以应用在需要一种目标蛋白质的多种衍生物,以及需要多个同系物时。典 型的方案包括对目标的评价、目标的克隆和诱变、表达筛选、大规模的表达和纯化,以及对所产生蛋白质的分析和生物物理测试。本章介绍了一些用于平行蛋白质表达和纯化的策略及方法。
作者: 伯吉斯等,主译:陈薇,本实验来自「蛋白质纯化指南」

来源:丁香实验

操作方法

表达与纯化的平行方法实验

一、引言 平行蛋白质纯化主要是一个逻辑学的挑战。有许多纯化方法可以用于蛋白质分离。一些方法从本质上比其他方法更经得起平行方法的检验(Gmslund etal., 2008a; Kimetal.,2004; Lesley et aL,2002b)。 多数平行纯化策略使用纯化标签, 这样可以使简单的标准化亲和纯化的方法变得更容易。虽然在这个方案中描述了一个用蛋白酶 切 割 H i s

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