用于光指导的基因传递的光化学内化技术实验

其他实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

光化学内化（photochemical internalization, P C I ) 可以通过光定向破坏细胞的内吞小泡的机制得到高效的转染（Berg et al.1999)。这项技术的原理是先将光敏剂定位于细胞内吞小泡的膜上，然后光照导致膜的破裂。内吞化合物（如核酸）就释放到细胞中作用于其靶点或进一步转运到细胞核中。
作者：T.弗里德曼等,译者：殷勤伟等，本实验来自「基因转移」

来源：丁香实验

操作方法

光化学增强基因转运

光化学增强基因转运材料试剂准备转染的细胞适当的细胞培养液核酸或重组病毒在使用之前用细胞培养液新鲜稀释核酸（如 DNA 多聚物），用无血清的细胞培养液或 PBS按照感染滴度新鲜稀释重组腺病毒、腺相关病毒或其他可能内吞的病毒。 DNA 或病毒载体的使用数量要根据细胞株和载体的具体情况定。我们推荐使用 D N A 浓度为 0. 2〜5ug/ml, 病毒的起始感