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简介
水溶性脂高分子和脂肽是一类非病毒基因载体,它结合了脂质材料增加D N A 对细胞膜的通透性以及聚阳离子与D N A 缩合并促进基因在内含体逃逸的特点。通过氯甲酸胆固醇醋与分子质量为1800D a 的支化聚乙烯亚胺(P E I ) 的初级或次级胺的化学反应制备脂高分子。将 C K i V -琥珀酰亚胺基)-iV, N , A T , J V -四甲基脲四氟硼酸酯(T S T U )与石胆酸在过量二异丙基乙胺(D I P E A ) 存在下混合,再与人鱼精蛋白来源的多肽反应则可以制备脂肽。使用分子质量为1800D a 的 P E I 是为了避免高分子质量P E I 引起的毒性。
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」
来源:丁香实验
操作方法
水溶性脂高分子/pDNA 及脂肽/pDNA 复合物的制备及使用 材料 试剂 重要:所有的溶剂均为 HPLC 级 支化聚乙嫌亚胺(PEI; 1800Da; Polysciences) C T -26 结肠癌细胞 氯甲酸胆固醇酯 乙醚 二异丙基乙胺溶液(DIPEA; l m o l /L , 溶于 DMF) 二甲基甲酰胺