A A V 衣壳肽展示库、易错 P C R 和 D N A 改组 。可通过自然突变和重组产生不同组织嗜性的A A V 血清型,从而将 A A V 转导到一些难感的细胞类型中去。另外,可利用血清同源体,用核衣壳移植或标记拯救技术用不同的血清型构建杂合载体。因 为 A A V 2 是了解最为透彻的血清型,这个血清型一般被用来作为构建A A V 杂合载体的模板。本章主要介绍构建具有扩大的组织嗜性的杂合A A V 载体的方法。
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」
A A V 血清型载体的构建
A A V 血清型载体的构建
材料
试剂
benzonase 核 酸 酶(S g m a -A ld ric h )
细 胞 :人 类 胚 胎 肾 细 胞 2 兕(A T C C )
氯 化 铯(Sigma-Aldrich)
加 有 1 0 % 胎 牛 血 清 和 1 % 青 霉 素 / 链 霉 素 的 D M E M 培 养 基(Sigm