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简介
当前,腺 病 毒 (A d ) 感染细胞的生命周期和生物学特征已经被研究得很清楚。在 A d 病毒感染和转基因的表达中,存在三个必需的连续步骤:①病毒结合到细胞表面受体上;②内化过程;③病毒基因组转移到细胞核。本章的实验方法介绍了 A d 病毒的构建方案,即如何利用这些病毒通过—级或二级A d 受体靶向、结合并进入IE细 胞 (转导过程),以及这些病毒携带的外源基因在靶细胞内的表达(转录和翻译)
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」
来源:丁香实验
操作方法
为转导靶向构建RG D- 修饰 纤 毛 的 A d 载体 材料 为纤毛修饰构建穿梭质粒载体 1.从回收质粒分离抗-氨苄青霉素的纤毛区域片段。 a.EcoRI酶切10吨抗-氨苄青霉素的PAdEasy-I 质粒4 h。 b.1 % 琼脂糖胶回收9. 6kb DNA片段。 c. 连接环化。 合 成 的 新 质 粒(pFiberdE
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