基于猫免疫缺陷病毒(F IV ) 的慢病毒载体对于介 导 整 合的转基因到非分裂的人体细胞是非常有用的。本章主要描述了生产和使用新一代F I V 载体的方法,讨论了 F IV和其他慢病毒载体相比较的关键特征,并提供了大规模/小规模载体生产的详细方案。此外,最近鉴定的种属特异的反转录病毒限制因素的实际应用和非整合的F I V 载体的生成也是本章讨论的主题
作者:T.弗里德曼等,译者:殷勤伟等,本实验来自「基因转移」
基于猫免疫缺陷病毒的慢病毒载体的生产和使用
用生长在CFlO或者是CF2 设备中的细胞生产载体
材料
试剂
转染细胞系: 293T
早 期 的 293T 细胞比较好。它们可以在种植转染前持续均一地分裂。
DMEM加 1 0 % 胎 牛 血 清 (DMEM-10)、 lOO^/ml 青霉素 、 lOOug/ml 链霉素以及2mmol/L L-谷氨酸
质粒 DNA: pMD.G、 pFP