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胚胎干细胞体外培养与定向诱导分化实验

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简介

饲养细胞是胚胎来源的干细胞包括胚胎癌细胞 (EC)、胚胎干细胞 (ES)、原始生殖细胞 (EG) 等细胞在体外保持对称分裂不分化状态的必要条件。其作用机制不完全清楚。对于小鼠胚胎干细胞,饲养细胞分泌的 LIF 是保持其多能性的原因之一,因此,在某些鼠细胞培养中,饲养细胞或 LIF 二者有一即可。对于人类胚胎干细胞培养,饲养细胞目前仍是必需的。通常用两类细胞作为胚胎干细胞培养的饲养细胞,即原代培养的胚胎鼠成纤维细胞 (MEF) 或小鼠成纤维细胞 STO 系 (来源于近交系 SIM 小鼠, thioguanine andouabain-resistant)。经 y 射线照射或丝裂霉素 c 处理以抑制其有丝分裂活性,然后接种至明胶包被的培养皿,作为胚胎干细胞培养的饲养细胞。

作者:裴雪涛,本实验来自「干细胞实验指南」

来源:丁香实验

操作方法

胚 胎 干 细 胞 体 外 培 养 与 定 向 诱 导 分 化

胚胎干细胞分离培养 饲 养 细 胞 培 养 与 饲 养 层 制 备 饲养细胞是胚胎来源的干细胞包括胚胎癌细胞 (EC)、胚胎干细胞 (ES)、原始生殖细胞 (EG) 等细胞在体外保持对称分裂不分化状态的必要条件。其作用机制不完全清楚。对于小鼠胚胎干细胞,饲养细胞分泌的 LIF 是保持其多能性的原因之一,因此,在某些鼠细胞培养中,饲养细胞或 LIF 二者有一即可。对于人类胚

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