物理显影液配制实验

实验分类：

免疫学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验介绍各种物理显影液和的配置方法。

来源《免疫组织化学实验技术及应用》

来源：丁香实验

操作方法

硝酸银显影液

1. 1％明胶 60 ml。2. 柠檬酸缓冲液 10 ml，pH3.4（柠檬酸 2.55 g，柠槺酸钠 2.35 g，加水至 10 ml）。3. 对苯二酚 1～1.7 g，加水至 30 ml。4. 硝酸银 50～100 mg，加水至 2 ml。5. 用前 1~3 液混合过滤，最后加入 4 液。

乳酸银显影液

1. 10％～20％阿拉伯树胶 60 ml。2. 柠檬酸缓冲液（配法同上）。3. 对苯二酚 0.85 g，加水至 15 ml。4. 乳酸银 110 mg，加水至 15 ml。5. 以上 1～3 液用前混合过滤，最后加入 4 液。

醋酸银显影液

1. 100 mg 醋酸银溶解在 50 ml 三重蒸馏水中，用前 1 h 配制，并充分搅拌。2. 10％明胶 10 ml。3. pH 3.5～3.8 柠檬酸盐缓冲液 40 ml（内含 600 mg 对苯二酚）。4. 用前分别将 2、3 两液过滤混合，然后加入 50 ml 醋酸银液搅拌混匀。

彩色显影剂

A 液：二乙基对苯二胺硫酸盐（TSS）200 mg，无水碳酸钠 2 g，溴化钾 100 mg，无水亚硫酸钠 200 mg，加蒸馏水至 90 ml 搅拌溶解。B 液：α-萘酚 200 mg，加异丙醇 10 ml，或对硝基苯乙腈（碱性品红）200 mg 溶于 10 ml 丙酮中。临用前 A、B 两液混合，过滤后在室温下即可显色。

其他

漂白液在 10 ml 蒸馏水中加入 10 g 铁氰化钾和 5 g 溴化钾。定影液铁氰化钾 5 g、溴化钾 2.5 g、硫代硫酸钠 3 g 依次加入到 95 ml 蒸馏水中，最终加水至 100 ml。缓冲液缓冲液 I：0.02 mol/L（pH 7.4）TBS（内含 0～1％ Triton X-100，0～1％ BSA，0.01％ NaN3）。缓冲液 II：0.05 mol/L（pH 8.2）TBS