间接凝集反应实验

1. “O”抗原的制备： 将每毫升100亿的伤寒杆菌“O”菌悬液，置100℃水浴中2小时，离心沉淀吸取上清夜，分装无菌试管，放4℃冰箱备用。 2. 致敏红血球悬液制备： 取一定稀释度的抗原加等量2.5%绵羊红血球悬液，混合后放37℃水浴箱中，每隔15分钟取出振摇一次，共经2小时。然后取出，用生理盐水洗涤3次，而配制成0.5%悬液即成。 3. 实验步骤：

1. 用清洁滴管在反应板上滴加一滴被检尿。 2. 再往尿滴加抗血清一滴，轻轻摇动，充分混匀。 3. 滴加一滴，缓慢摇动3~5分钟，在较强光线下，观察结果。出现均匀一致的细小颗粒为阴性反应，怀孕。

1. 10%葡萄球菌菌悬液的制备：CoWan1株葡萄球菌接种于柯氏瓶，37℃培养18-24小时，用PBS洗下菌苔，每分钟2500转速度离心20分钟。沉淀菌用PBS洗两次后，用0.5%甲醛（用PBS配置）在室温中固定3小时。置于80℃水浴中4分钟以破坏菌体的自源性分解酶。再用PBS洗涤2次后配成10%菌悬液。 2. 致敏葡萄球菌：1毫升10%的菌悬液加0.1毫升伤寒O抗血清充分混合放入3