血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应,产生偶氮胆红素,在同样条件下,游离胆红素须有加速剂,使胆红素氢键破坏后于重氮试剂反应,咖啡因,苹果酸钠为加速剂,硝酸钠维持PH同时亦有加速作用,抗坏血酸(或叠氮钠)破坏剩余重氮试剂,中止结台胆红素测定管的偶氮反应,防止游离胆红素的缓慢反应,加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转移到598nm,非胆红素的黄色色素及其它红色色素,与棕色素产生的吸光度降至可略而不计,使灵敏度和特异性增加,最后形成的绿色是蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。本实验来源于牡丹江医学院 本科 5 年制检验专业实验指导
血清总胆红素和结合胆红素测定实验一、实验试剂;
1. 咖啡因一苹果酸钠试剂,称取无水醋酸钠41.0g(CH3COONa·3H2O6 3.0g)苯甲酸钠38.0g,乙二胺四乙酸二钠(EDTA Na2)0.5g,溶于500ml蒸馏水中,再加入咖啡因25.0g搅拌使溶解(加入咖啡因后不发生加热溶解),用蒸馏水补足1升,混匀,用滤纸过滤,置棕色瓶,室温保存。
2. 碱性酒石酸钠溶液:称取氢氧化钠75g酒石酸钠(Na2C4H4O6·2