磷酸化位点分析实验-确定磷酸化氨基酸类型

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

来源：《蛋白质组学：从序列到功能》

来源：丁香实验

操作方法

基本方案

了解肽或蛋白质中磷酸化氨基酸的类型，可以限定可能的磷酸化位点，并因此简化(对多肽链中磷酸化残基的确认。磷酸化残基类型通常由磷酸氨基酸分析或磷酸氨基酸特异性免疫检测确定。磷酸氨基酸分析是对肽键进行气相或液相水解，此水解条件下要至少保留一段磷酸酯键完整。 32p标记的磷酸蛋白质或磷酸肽的水解产物与磷酸氨基酸标准品混合，并用TLC 分离。未标记的标准品由茚三酮染色检测。32p标记氨基酸由放射自显影检测。