亲和柱的制备实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本节将重点叙述用溴化氰活化的琼脂糖凝胶配体固相化技术。绝大多数配体，如多肽、蛋白质、凝集素和核酸，都能较容易地用该法偶联。

来源：《蛋白质技术手册》

来源：丁香实验

操作方法

配基固相化技术

1. 取 2 g 溴化氰活化的琼脂糖凝胶加入玻璃漏斗内 1 mmol/L 盐酸中，用玻棒轻轻搅动 20 min直至介质完全溶胀。静置待混悬的介质沉降后，用真空泵吸去液体。1 g 干凝胶可以获得 3.5 ml 溶胀胶；2. 用 200 ml 1 mmol/L 盐酸洗介质，共3次，每次洗后吸去液体；3. 用偶联缓冲液（0.1 mol/L 碳酸氢钠，0.5 mol/L 氯化钠，pH 8.3）冼介质一次。