最新修订时间:
简介
蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物,当酶样品中含有磷酸转移酶活性时,蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。
内容来源于《精编分子生物学实验指南(第五版)》
来源:丁香实验
操作方法
1. 对 1.5 ml 微量离心管做双管标记,每个反应按以下比例加入各反应组分:5 μl 5×CaM 激酶反应缓冲液5 μl 10 mmol/L 合成肽底物溶液5 [γ-32P] ATP 溶液(ATP 终浓度为 5 mmol/L, 放射活性为 5 μCi/μl)5 μl 1 mg/ml 钙调蛋白或 5 μl 水0~30 μl 水盖好离心管,混匀,放入 30℃ 水浴温育 10 min。2. 每 30