以AtT20脑垂体细胞作为模型进行神经内 分泌肽能系统干扰中的蛋白质组学分析实验

环境污染物可以影响许多胞内酶活性。酶抑制因子对蛋白质组的影响可以利用双向电泳来确定。在神经内分泌细胞中，前体蛋白转化酶 1 和 2 (proprotein convertase 1 和2, P C l 和 PC2 ) 介导许多蛋白质前体水解为肽激素和神经肽。这些钙离子依赖的蛋白酶的活性可以被环境中的螯合剂和重金属离子调节。这种抑制可以导致潜在的肽能系统的病理性破坏。我们想要知道这些酶的特异性的抑制在何种程度上可以影响神经内分泌细胞的蛋白质组。为了解决这个问题，我们采用鼠脑垂体 AtT2 0 细胞作为模型。我们比较对照细胞和过表达 P C l 特异抑制剂 proSAAS 的细胞的蛋白质组。比对过程包括双向电泳、差异蛋白的质谱鉴定以及免疫印迹验证。双向电泳分析显示 proSAAS 过表达的细胞的蛋白质组有许多改变。对酶解后的肽段进行质谱分析发现 proSAAS 和 EphrinA 类受体 2 这两种蛋白质在该种细胞中丰度增加。
作者：马丁,本实验来自「环境基因组学实验指南」