基于纤连蛋白类型Ⅲ结构域框架的抗体模拟实验

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

我们发展了用人纤连蛋白的第 10 个纤连蛋白类型Ⅲ结构域（FNfnlO)作为框架以显示用于与其他分子结合的多重表面链套的用法。我们把具有新的结合功能的 FNfnlO 变体称为“独体（孤体、单小体)”。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。

来源：丁香实验

操作方法

基于纤连蛋白Ⅲ型结构域框架的抗体模拟实验

3.1 实物库构建我们用 Kunkel 突变技术构建大多数的实物库虽然我们证明了 AB 链套可用来结合目标分子，但多数情况下，我们用 FNfn10 的 “上” 端（BC、DE 和 FG 链套；图 6.1A ) 作为目标分子结合位点 [ 10 ]。我们的方法基于 Bio-Rad 的 Mutagene kit [17]。用大肠杆菌 SS320 做电转化，可以很容易地制备含有大约 109 个独立克隆