大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入实验

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

氨基酸类似物的掺入越来越有用。非天然氨基酸的定点掺入，使得运用化学生物学对特定蛋白质的研究和应用成为可能。但是，非天然氨基酸的整体掺入也检验着蛋白质组和基因编码假定。例如，有机体对非天然氨基酸的适应可能会导致新的基因编码。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。

来源：丁香实验

操作方法

大肠杆菌中非天然氨基酸的整体掺入

下述方法包括： ( 1 ) 大肠杆菌在色氨酸类似物中的生长。 ( 2 ) 含 fW 取代氨基酸的蛋白质的表达和纯化。 ( 3 ) 对非天然氨基酸进行深入水平的分析。 3.1 大肠杆菌在非天然氨基酸（培养基）上的生长色氨酸类似物掺入大肠杆菌是直截了当的。因为色氨酰转移 RNA 合成酶没有编辑结构域，天然氨基酸与类似物的区分只是在结构上。枯草杆菌色氨酰转移 RNA 合成酶可以相对更有效地结