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胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

实验分类:

蛋白质实验

最新修订时间:

简介

本实验中,我们将考察胰岛素受体的胰岛素刺激酪氨酸激酶活性。用抗磷酸酪氨酸抗体(antiphosphotyrosine antiboty) 来检测磷酸化的受体,后者可用 SDS-PAGE 来分离。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。

来源:丁香实验

操作方法

胰岛素剌激的胰岛素受体自磷酸化实验

材料与设备纯化的鼠肝细胞质膜(见本单元实验 1)部分纯化的胰岛素受体,得自 WGA-琼脂糖柱层析(见实验本单元 3)純化的胰岛素受体,得自胰岛素琼脂糖柱层析(见实验本单元 4)猪胰岛素〔17,5pmol/L(0.1 mg/ml),溶于 0.001mol/LHCl〕(如 Sigma Chemical Co.13505)ATP(20 mmol/L;pH7.4)蛋白质凝胶电泳装置(Bio-Rad Lab

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